Wird aus Cholesterin gewonnen, Vitamin D wird aus seinem Prohormon Cholecalciferol biosynthetisiert (D3), das Produkt der ultravioletten Sonnenbestrahlung von 7-Dehydrocholesterin in der Haut. In 1966, Zunächst wurde erkannt, dass Vitamin D über zwei oxidative Stoffwechselschritte aktiviert werden muss. Die erste Oxidation zu 25-Hydroxycholecalciferol (25(OH)D3: Calcifediol; Calderol) kommt im endoplasmatischen Retikulum der Leber vor und wird durch Vitamin-D-25-Hydroxylase katalysiert. Dieser Aktivierungsschritt wird nicht durch die Plasmacalciumkonzentrationen reguliert. Die wichtigste Umlaufform (10-80 μg/ml) Ist 25(OH)D3, welches auch die primäre Speicherform von Vitamin D ist.