Kolesterolden türetilmiştir, D vitamini prohormonu kolekalsiferolden biyosentezlenir. (D3), Derideki 7-dehidrokolesterolün güneş ultraviyole ışınımının ürünü. İçinde 1966, D vitamininin iki oksidatif metabolik adım yoluyla aktivasyona uğraması gerektiği ilk kez fark edildi. 25-hidroksikolekalsiferole ilk oksidasyon (25(AH)D3: kalsifediol; Kalderol) Karaciğerin endoplazmik retikulumunda meydana gelir ve D vitamini 25-hidroksilaz tarafından katalize edilir.. Bu aktivasyon basamağı plazma kalsiyum konsantrasyonları tarafından düzenlenmez.. Dolaşımdaki başlıca form (10-80 µg/mL) öyle 25(AH)D3, aynı zamanda D vitamininin birincil depo şeklidir.
