MK-1775 är en hämmare av checkpoint-kinaset Wee1 (IC50 = 5.2 nM).1 Det har visat sig hämma fosforyleringen av Cdc2 vid tryosin-15, som upphäver kontrollpunkten för G2 DNA-skada.1 I p53-defekta tumörer som enbart förlitar sig på G2-kontrollpunkten vid DNA-skada, MK-1775, i kombination med DNA-skadande kemoterapeutiska medel, rapporteras inducera apoptos in vitro och potentiera hämningen av tumörtillväxt in vivo.
MK-1775-behandling ledde till hämning av Wee1-kinas och minskad hämmande fosforylering av dess substrat Cdc2. MK-1775, vid dosering med gemcitabin, upphävde kontrollpunktsstoppet för att främja mitotiskt inträde och underlättade tumörcellsdöd jämfört med kontroll- och gemcitabinbehandlade tumörer. MK-1775 monoterapi inducerade inte tumörregressioner. Dock, kombinationen av gemcitabin med MK-1775 producerade robust antitumöraktivitet och anmärkningsvärt förbättrat tumörregressionssvar (4.01 vika) jämfört med gemcitabinbehandling i p53-bristtumörer. Tumöråterväxtkurvor plottade efter läkemedelsbehandlingsperioden tyder på att effekten av kombinationsbehandlingen är mer långvarig än den av gemcitabin. Inget av medlen producerade tumörregressioner i p53-vildtyp xenotransplantat.
MK-1775 hämmar Wee1-kinas på ett ATP-konkurrerande sätt. Jämfört med Wee1, MK-1775-skärmar 2- till 3 gånger mindre styrka mot Ja med IC50 av 14 nM, 10-vika mindre styrka mot sju andra kinaser med >80% hämning kl 1 μM, och >100-vik selektivitet över mänsklig Myt 1, ett annat kinas som hämmar cyklinberoende kinas 1 (CDC2) genom fosforylering vid en alternativ plats (Thr14).
Genom att upphäva DNA-skadekontrollpunkten via blockad av Wee1-aktivitet i WiDr-celler som bär muterad p53, MK-1775-behandling hämmar den basala fosforyleringen av CDC2 vid Tyr15 (CDC2Y15) med EC50 av 49 nM, och dämpar gemcitabin-, karboplatin- eller cisplatin-inducerad fosforylering av CDC2 och cellcykelstopp på ett dosberoende sätt, med EC50 av 82 nM och 81 nM, 180 nM och 163 nM, liksom 159 nM och 160 nM, respektive. MK-1775 behandling ensam kl 30-100 nM har ingen signifikant antiproliferativ effekt i WiDr- och H1299-celler, medan MK-1775 kl 300 nM, tillräckligt för att hämma Wee1 genom >80%, visar måttliga men signifikanta antiproliferativa effekter genom 34.1% i WiDr-celler och 28.4% i H1299-celler.
