MK-1775 is 'n inhibeerder van die kontrolepuntkinase Wee1 (IC50 = 5.2 nM).1 Daar is getoon dat dit die fosforilering van Cdc2 by triosien-15 inhibeer, wat die G2 DNA-skadekontrolepunt ophef.1 In p53-tekorte gewasse wat uitsluitlik op die G2-kontrolepunt staatmaak op DNA-skade, MK-1775, in kombinasie met DNA-beskadigende chemoterapeutiese middels, word gerapporteer dat dit apoptose in vitro veroorsaak en die inhibisie van tumorgroei in vivo versterk.
MK-1775 behandeling het gelei tot die inhibisie van Wee1 kinase en verminderde inhiberende fosforilering van sy substraat Cdc2. MK-1775, wanneer gedoseer met gemcitabien, het die inhegtenisneming van die kontrolepunt opgehef om mitotiese toetrede te bevorder en tumorsel-dood vergemaklik in vergelyking met kontrole- en gemcitabien-behandelde gewasse. MK-1775 monoterapie het nie tumorregressies veroorsaak nie. Egter, die kombinasie van gemcitabien met MK-1775 het robuuste anti-tumor aktiwiteit en merkwaardig verbeterde tumor regressie reaksie (4.01 vou) in vergelyking met gemcitabienbehandeling in p53-tekorte gewasse. Tumorhergroeikurwes wat na die geneesmiddelbehandelingsperiode geplot is, dui daarop dat die effek van die kombinasieterapie langer duur as dié van gemcitabien. Geen van die middels het tumorregressies in p53-wildtipe xeno-oorplantings geproduseer nie.
MK-1775 inhibeer Wee1 kinase op 'n ATP-mededingende wyse. In vergelyking met Wee1, MK-1775-skerms 2- tot 3-voudig minder sterkte teen Ja met IC50 van 14 nM, 10-vou minder sterkte teen sewe ander kinases met >80% inhibisie by 1 μM, en >100-vou selektiwiteit oor menslike Myt 1, 'n ander kinase wat siklien-afhanklike kinase inhibeer 1 (CDC2) deur fosforilering by 'n alternatiewe plek (Thr14).
Deur die DNA-skadekontrolepunt te herroep deur blokkade van Wee1-aktiwiteit in WiDr-selle wat gemuteerde p53 dra, MK-1775 behandeling inhibeer die basale fosforilering van CDC2 by Tyr15 (CDC2Y15) met EC50 van 49 nM, en onderdruk gemcitabien-, karboplatien- of cisplatien-geïnduseerde fosforilering van CDC2 en selsiklus arrestasie op 'n dosis-afhanklike wyse, met EC50 van 82 nM en 81 nM, 180 nM en 163 nM, sowel as 159 nM en 160 nM, onderskeidelik. MK-1775 behandeling alleen by 30-100 nM het geen beduidende antiproliferatiewe effek in WiDr- en H1299-selle nie, terwyl MK-1775 by 300 nM, voldoende om Wee1 te inhibeer deur >80%, vertoon matige maar beduidende antiproliferatiewe effekte deur 34.1% in WiDr selle en 28.4% in H1299-selle.
