MK-1775 è un inibitore della chinasi del checkpoint Wee1 (IC50 = 5.2 nM).1 È stato dimostrato che inibisce la fosforilazione di Cdc2 nella tirosina-15, che abroga il checkpoint G2 del danno al DNA.1 Nei tumori carenti di p53 che si basano esclusivamente sul checkpoint G2 in caso di danno al DNA, MK-1775, in combinazione con agenti chemioterapici dannosi per il DNA, è stato riportato che induca l'apoptosi in vitro e potenzi l'inibizione della crescita del tumore in vivo.
Il trattamento con MK-1775 ha portato all'inibizione della chinasi Wee1 e alla ridotta fosforilazione inibitoria del suo substrato Cdc2. MK-1775, quando somministrato con gemcitabina, ha abrogato l'arresto del checkpoint per promuovere l'ingresso mitotico e facilitare la morte delle cellule tumorali rispetto ai tumori trattati con controllo e con gemcitabina. La monoterapia con MK-1775 non ha indotto regressioni del tumore. Tuttavia, la combinazione di gemcitabina con MK-1775 ha prodotto una robusta attività antitumorale e una risposta di regressione del tumore notevolmente migliorata (4.01 piega) rispetto al trattamento con gemcitabina nei tumori con deficit di p53. Le curve di ricrescita tumorale tracciate dopo il periodo di trattamento farmacologico suggeriscono che l’effetto della terapia di combinazione è più duraturo di quello della gemcitabina. Nessuno degli agenti ha prodotto regressioni tumorali negli xenotrapianti p53-wild type.
MK-1775 inibisce la chinasi Wee1 in modo competitivo con l'ATP. Rispetto a Wee1, Visualizza l'MK-1775 2- a 3 volte meno potenza rispetto a Sì con IC50 di 14 nM, 10-piega meno potenza contro altre sette chinasi con >80% inibizione a 1 µM, E >100-piega la selettività sul Myt umano 1, un'altra chinasi che inibisce la chinasi ciclina-dipendente 1 (CDC2) mediante fosforilazione in un sito alternativo (Thr14).
Annullando il checkpoint del danno al DNA tramite il blocco dell'attività di Wee1 nelle cellule WiDr portatrici di p53 mutato, Il trattamento con MK-1775 inibisce la fosforilazione basale di CDC2 a Tyr15 (CDC2Y15) con EC50 di 49 nM, e sopprime la gemcitabina-, carboplatino- o fosforilazione indotta da cisplatino di CDC2 e arresto del ciclo cellulare in modo dose-dipendente, con EC50 di 82 nM e 81 nM, 180 nM e 163 nM, così come 159 nM e 160 nM, rispettivamente. Solo il trattamento MK-1775 a 30-100 nM non ha alcun effetto antiproliferativo significativo nelle cellule WiDr e H1299, mentre MK-1775 a 300 nM, sufficiente per inibire Wee1 >80%, mostra effetti antiproliferativi moderati ma significativi 34.1% nelle cellule WiDr e 28.4% nelle cellule H1299.
